大肠杆菌摇了24小时还能用吗

大肠杆菌摇菌24小时后是否能用需根据菌液状态决定,若菌液浑浊度适中且无污染通常可用,若出现沉淀、异味或污染则不可用。大肠杆菌摇菌是实验室培养细菌的常规操作,摇菌时间过长可能导致细菌过度繁殖或死亡。

大肠杆菌摇了24小时还能用吗

摇菌24小时后若菌液呈现均匀浑浊状态,表明细菌生长良好,活菌数量充足,可用于后续实验。此时菌液OD600一般在0.5-1.5之间,处于对数生长期后期或稳定期早期,适合进行质粒提取、蛋白表达等操作。需注意摇菌温度应控制在37摄氏度,转速维持在200-250转/分钟,使用LB等适宜培养基。菌液颜色应为淡黄色至乳白色,摇晃后无明显颗粒或絮状物。

大肠杆菌摇了24小时还能用吗

摇菌24小时后若菌液出现明显沉淀、分层或粘稠拉丝现象,提示细菌可能已进入衰亡期,活菌比例下降。菌液颜色变深、产生酸臭或腐败气味,或表面形成菌膜,表明可能存在杂菌污染。此类菌液进行转化实验时效率显著降低,用于蛋白表达可能产生包涵体。若离心后菌体难以重悬或呈现异常颜色,应弃用并重新培养。

大肠杆菌摇了24小时还能用吗

建议每次摇菌前检查摇床温度与转速稳定性,使用新鲜活化的单克隆菌落接种。长时间摇菌可每12小时取样检测OD值,超过18小时需密切观察菌液状态。实验前进行革兰氏染色镜检确认菌体形态,必要时做平板划线验证纯度。废弃菌液须经121摄氏度高压灭菌处理,避免环境污染。

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